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超微量核酸蛋白分析儀的使用誤區(qū)
點(diǎn)擊次數(shù):3534 發(fā)布時(shí)間:2018/12/4 16:08:42

超微量核酸蛋白分析儀是一款檢測(cè)DNA,RNA濃度和純度的儀器,能夠快速測(cè)量核酸的濃度。每次測(cè)量所需要的樣品量?jī)H需0.5至2ul即可。直接將樣品點(diǎn)于樣板上。無(wú)需比色杯或毛細(xì)管等附件。測(cè)量結(jié)束后,可以選擇直接將樣品擦去或者再用移液器回收樣品。

超微量核酸蛋白分析儀的使用誤區(qū):
  1)測(cè)量核酸時(shí)發(fā)現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn):首先要確定核酸樣品的純度,如果是DNA樣品,260/280比值應(yīng)該在1.6-2.0之間。比值小于1.6說(shuō)明有蛋白類(lèi)物質(zhì)的干擾,大于2.0說(shuō)明有 RNA的干擾。如果是RNA樣品,260/280應(yīng)該大于2.0,如果值偏高如2.5以上,可能是RNA降解的原因,如果小于2.0說(shuō)明有蛋白類(lèi)物質(zhì)的干擾。還可以通過(guò)230nm、和320nm處的吸收峰來(lái)判斷樣品的純度,230表示存在以下污染物如:碳水化合物、多肽、苯酚等,核酸和蛋白在320nm處的吸收峰幾乎為零,所以如果有吸收說(shuō)明有雜質(zhì),可能是稠環(huán)芳香有機(jī)試劑的污染。

  2)適合測(cè)量純度高的蛋白樣品,不能測(cè)量含有雜質(zhì)的蛋白樣品:通過(guò)上面的公式我們能夠發(fā)現(xiàn),c值是與吸光度A成正比的,如果樣品中含有雜質(zhì)成分,且雜質(zhì)在280處有吸收峰的話就會(huì)造成測(cè)量值不準(zhǔn),一般我們提蛋白過(guò)程中使用的有機(jī)試劑如果殘留的話就會(huì)造成測(cè)量蛋白值不準(zhǔn)的情況。

  3)測(cè)量?jī)蓚€(gè)樣品中間務(wù)必要用吸水的面巾紙和蒸餾水清潔測(cè)量臂:如果不做清潔,殘留的樣品會(huì)對(duì)后來(lái)樣品的測(cè)量造成影響。切記不要用擦鏡紙擦拭,因?yàn)椴羚R紙不吸水。

  4)測(cè)量同一個(gè)樣品的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng):因?yàn)樯蠘恿亢苌?,隨著時(shí)間的推遲樣品會(huì)有所蒸發(fā),造成測(cè)量出來(lái)的濃度有誤差。

  5)如果測(cè)量值不是很準(zhǔn),建議可以把樣品稀釋到適當(dāng)濃度再進(jìn)行測(cè)量。

  6)如果感覺(jué)機(jī)器的平衡性不好,可以通過(guò)以下方法檢測(cè):以空氣為blank,反復(fù)測(cè)量空氣,兩次測(cè)量之間間隔5秒,測(cè)出的吸光度值應(yīng)該小于0.04,說(shuō)明平衡性良好。